简介： 本发明公开了一种组织工程心肌补片制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、取成年猪心；S2、冲孔机打孔获取左心室心肌块；S3、心肌块冻存于‑80℃至少16小时；S4、解冻心肌块，切取厚度为1cm心肌块并用琼脂糖包埋；S5、用陶瓷叶片振荡切片机，切割心肌块，获得厚度约为300‑500μm、直径约为14mm的心肌组织薄片；S6、制备得到去细胞心肌组织薄片；S7、将hiPSC‑CM体外定向诱导分化14‑16日；S8、胰蛋白酶消化获取细胞悬液，以2×107个细胞/cm2接种量，种植iPSC‑CMs于S6制备的去细胞心肌组织薄片，继续培养载hiPSC‑CM组织工程心肌薄片1‑28日得到组织工程心肌补片。该组织工程心肌补片制备方法，制备方法过程简单，可以稳定高效的满足对组织工程心肌补片的培养制备，满足医疗使用要求。