提高乙醇产率的酿酒酵母spt15定点饱和基因突变方法
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提高乙醇产率的酿酒酵母spt15定点饱和基因突变方法
来源:北方有色网
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简介: 本发明提出了一种提高乙醇产率的酿酒酵母spt15定点饱和基因突变方法。它是利用基因工程手段得到酿酒酵母的spt15定点饱和突变基因,并连接到表达载体pYES2NTc上, 构建突变库,共得到了12个单点突变基因,与野生型基因spt15,spt3及对照基因Neo基因构建重组质粒,分别用醋酸锂法转入酿酒酵母INVSC1中,得到15个重组的酿酒酵母菌株。以葡萄糖为底物,将重组酿酒酵母接种发酵,测定其乙醇产率,其中重组酿酒酵母菌INVSC1?SPT15?M,INVSC1?SPT15?N,乙醇产率大幅度提高,分别为43.0±0.9g/L和43.7±0.2g/L。比对照菌株INVSC1?Neo分别增加17.8%和19.7%。2个突变基因在127位分别由赖氨酸突变为甲硫氨酸和天冬酰胺。本发明方法简单,操作容易,乙醇产率提高效果明显。具有很好的经济效益和社会效益。
本发明提出了一种提高乙醇产率的酿酒酵母spt15定点饱和基因突变方法。它是利用基因工程手段得到酿酒酵母的spt15定点饱和突变基因,并连接到表达载体pYES2NTc上, 构建突变库,共得到了12个单点突变基因,与野生型基因spt15,spt3及对照基因Neo基因构建重组质粒,分别用醋酸法转入酿酒酵母INVSC1中,得到15个重组的酿酒酵母菌株。以葡萄糖为底物,将重组酿酒酵母接种发酵,测定其乙醇产率,其中重组酿酒酵母菌INVSC1?SPT15?M,INVSC1?SPT15?N,乙醇产率大幅度提高,分别为43.0±0.9g/L和43.7±0.2g/L。比对照菌株INVSC1?Neo分别增加17.8%和19.7%。2个突变基因在127位分别由赖氨酸突变为甲硫氨酸和天冬酰胺。本发明方法简单,操作容易,乙醇产率提高效果明显。具有很好的经济效益和社会效益。
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