简介： 本发明提出了一种从α-熊果苷发酵液中分离对苯二酚的方法，其包括：（1）利用磷酸三丁酯作为萃取剂，对α-熊果苷发酵液进行萃取，并且分别分离萃取相和萃余相，其中，所述萃取剂与α-熊果苷发酵液的体积比为1：0.5~2，所述萃取相含有对苯二酚；以及（2）利用反萃液对步骤（1）中所获得的萃取相进行反萃，以便从所述萃取相分离对苯二酚，其中，所述反萃液为碱溶液或者酸溶液，并且所述萃取相与所述反萃液的体积比为1：0.01~0.5。该方法能以较低的成本高效提取α-熊果苷发酵液中的对苯二酚，不但可以提高对苯二酚的除杂率，而且可以获得高纯度的α-熊果苷并减少废水的排放，对提高生物法制备α-熊果苷的经济性具有重要价值。