利用粉丝废水生产渔用生长激素蛋白的方法及其应用
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利用粉丝废水生产渔用生长激素蛋白的方法及其应用
来源:北方有色网
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简介: 本发明公开了利用粉丝废水生产渔用生长激素蛋白的菌株、方法及应用。首先是菌种活化,所用菌株为大肠杆菌,保藏于中国典型培养物保藏中心,名称Escherichia coli BL21(DE3)hsdS gal pET28a‑THG,编号为CCTCC NO:M 2018014。然后进行菌株液态发酵培养基制作,将自来水和粉丝废水按体积比2:3,同时,添加蛋白胨6.0 g,酵母提取物4.0 g,氯化钠7.0 g,用1.0M的NaOH调节pH=7.0‑7.4,灭菌后使用。再按接种量为1%~3%进行扩大培养,在温度37土1.0℃,搅拌转速在150~250 rpm,培养时间15~25 h,菌液生长到菌体的光密度OD(optical density)值为0.5时,加入IPTG(异丙基‑β‑D‑硫代半乳糖苷)进行诱导目的蛋白表达。IPTG浓度为0.5μmol/l,诱导表达到最佳时间1.5 h时,诱导温度为37℃,诱导转速为100 rpm,THG蛋白表达量最大。发酵后的菌液,可以拌饲料投喂鱼类,也可在饲料加工时,直接掺和到饲料中投喂鱼类,对鱼类生长有明显的促生长效果,增产效果显著。
本发明公开了利用粉丝废水生产渔用生长激素蛋白的菌株、方法及应用。首先是菌种活化,所用菌株为大肠杆菌,保藏于中国典型培养物保藏中心,名称Escherichia coli BL21(DE3)hsdS gal pET28a‑THG,编号为CCTCC NO:M 2018014。然后进行菌株液态发酵培养基制作,将自来水和粉丝废水按体积比2:3,同时,添加蛋白胨6.0 g,酵母提取物4.0 g,氯化钠7.0 g,用1.0M的NaOH调节pH=7.0‑7.4,灭菌后使用。再按接种量为1%~3%进行扩大培养,在温度37土1.0℃,搅拌转速在150~250 rpm,培养时间15~25 h,菌液生长到菌体的光密度OD(optical density)值为0.5时,加入IPTG(异丙基‑β‑D‑硫代半乳糖苷)进行诱导目的蛋白表达。IPTG浓度为0.5μmol/l,诱导表达到最佳时间1.5 h时,诱导温度为37℃,诱导转速为100 rpm,THG蛋白表达量最大。发酵后的菌液,可以拌饲料投喂鱼类,也可在饲料加工时,直接掺和到饲料中投喂鱼类,对鱼类生长有明显的促生长效果,增产效果显著。
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标签:废水处理
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