简介： 本发明涉及分析检测技术领域，具体涉及多种维生素D代谢物联合检测方法及其检测试剂盒和应用。本发明提供的检测维生素D代谢物的方法为采用液相色谱串联质谱法进行检测，其中，液相色谱的流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为含有醋酸锂的水溶液，所述流动相B为含有醋酸锂的甲醇溶液。该方法可实现25OHD₃、25OHD₂、1,25(OH)₂D₃、1,25(OH)₂D₂、24,25(OH)₂D₃、24,25(OH)₂D₂的同时检测，可同时区分多种同分异构体和干扰；具有较高的灵敏度和特异性，且不需要衍生化处理，节约样本前处理时间，为维生素D代谢物的高通量检测提供便利。