檀香高含量精油组织总RNA的提取方法
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檀香高含量精油组织总RNA的提取方法
来源:北方有色网
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简介: 本发明公开了一种提取檀香高含量精油组织总RNA的方法。取檀香木材组织液氮研磨成粉末后,加入到Tris‑HCl提取液中,‑80°冷冻处理,离心取上清,再加入醋酸钠和异丙醇沉淀RNA,离心后用TE缓冲液溶解沉淀,然后加入十六烷基三甲基溴化铵混匀,用氯仿/异戊醇抽提,离心,取上清,加入氯化锂过夜沉淀RNA,离心,用乙醇洗涤后,即得总RNA。利用本发明方法提取的檀香木材组织总RNA用Nanodrop检测的OD260/OD280的比值为2.0以上,OD260/OD230的比值为2.3以上,RNA水溶液的浓度在800.0ng/μL以上,并且RIN高于7.5;经1.0%琼脂糖凝胶变性电泳检测显示RNA条带清晰,完整性好,具有高质量、高浓度的优点。
本发明公开了一种提取檀香高含量精油组织总RNA的方法。取檀香木材组织液氮研磨成粉末后,加入到Tris‑HCl提取液中,‑80°冷冻处理,离心取上清,再加入醋酸钠和异丙醇沉淀RNA,离心后用TE缓冲液溶解沉淀,然后加入十六烷基三甲基溴化铵混匀,用氯仿/异戊醇抽提,离心,取上清,加入氯化过夜沉淀RNA,离心,用乙醇洗涤后,即得总RNA。利用本发明方法提取的檀香木材组织总RNA用Nanodrop检测的OD260/OD280的比值为2.0以上,OD260/OD230的比值为2.3以上,RNA水溶液的浓度在800.0ng/μL以上,并且RIN高于7.5;经1.0%琼脂糖凝胶变性电泳检测显示RNA条带清晰,完整性好,具有高质量、高浓度的优点。
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