基于CD63抗体偶联磁珠的外泌体分离方法
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基于CD63抗体偶联磁珠的外泌体分离方法
来源:北方有色网
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简介: 本发明公开了一种基于CD63抗体偶联磁珠的外泌体分离方法,包括以下步骤:在streptactin磁珠表面功能化处理修饰CD63抗体,过滤待测细胞培养上清液样本,将过滤后的待测细胞培养上清液样本与CD63抗体偶联磁珠混合并孵育;分离孵育后的混合物,得到磁吸附物和分离液;洗涤磁吸附物,并将洗涤后的磁吸附物与洗脱缓冲液混合并孵育,使固液分离,收集外泌体提取液。本发明可获得高纯度的外泌体,不影响外泌体的结构形态和生理功能,分离特异性强,重复性好,提高了对外泌体的捕获效率,并在温和条件下无损释放捕获的外泌体,以达到回收外泌体用于后续研究的目的,操作简单快速,解决现有技术中外泌体分离方法分离纯度低、影响外泌体功能分析及工程化应用的缺陷问题。
本发明公开了一种基于CD63抗体偶联磁珠的外泌体分离方法,包括以下步骤:在streptactin磁珠表面功能化处理修饰CD63抗体,过滤待测细胞培养上清液样本,将过滤后的待测细胞培养上清液样本与CD63抗体偶联磁珠混合并孵育;分离孵育后的混合物,得到磁吸附物和分离液;洗涤磁吸附物,并将洗涤后的磁吸附物与洗脱缓冲液混合并孵育,使固液分离,收集外泌体提取液。本发明可获得高纯度的外泌体,不影响外泌体的结构形态和生理功能,分离特异性强,重复性好,提高了对外泌体的捕获效率,并在温和条件下无损释放捕获的外泌体,以达到回收外泌体用于后续研究的目的,操作简单快速,解决现有技术中外泌体分离方法分离纯度低、影响外泌体功能分析及工程化应用的缺陷问题。
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