犬脂肪干细胞的提取方法及其制剂和应用
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犬脂肪干细胞的提取方法及其制剂和应用
来源:北方有色网
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简介: 本发明采用犬异体脂肪干细胞制备治疗犬慢性肾病制剂,本发明的脂肪干细胞提取方法包括:获得犬腹腔脂肪组织、消化过滤离心、红细胞裂解液重悬、P0~P3代细胞培养。将得到的P3代的脂肪干细胞进行表面抗原检验,筛选出CD29、MHC‑I表达大于70%,且CD34、CD45表达小于2%,分化潜能高,能成脂、成骨、成软骨且染色体无异常,内毒素为阴性,支原体未检出的脂肪干细胞,以1×106细胞/kg~5×106细胞/kg的剂量,用0.5mL~1.0mL生理盐水重悬制备得到犬异体脂肪干细胞制剂,用于治疗犬慢性肾病。本发明的干细胞制剂免疫原性弱;不涉及社会、伦理、法律方面争论;无需接受移植者提供自体干细胞,几乎无损伤;分离方法简单,细胞活力很强,容易大量扩增。
本发明采用犬异体脂肪干细胞制备治疗犬慢性肾病制剂,本发明的脂肪干细胞提取方法包括:获得犬腹腔脂肪组织、消化过滤离心、红细胞裂解液重悬、P0~P3代细胞培养。将得到的P3代的脂肪干细胞进行表面抗原检验,筛选出CD29、MHC‑I表达大于70%,且CD34、CD45表达小于2%,分化潜能高,能成脂、成骨、成软骨且染色体无异常,内毒素为阴性,支原体未检出的脂肪干细胞,以1×106细胞/kg~5×106细胞/kg的剂量,用0.5mL~1.0mL生理盐水重悬制备得到犬异体脂肪干细胞制剂,用于治疗犬慢性肾病。本发明的干细胞制剂免疫原性弱;不涉及社会、伦理、法律方面争论;无需接受移植者提供自体干细胞,几乎无损伤;分离方法简单,细胞活力很强,容易大量扩增。
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