人蜕膜MDSCs的分离方法
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人蜕膜MDSCs的分离方法
来源:北方有色网
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简介: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种人蜕膜MDSCs的分离方法,该分离方法包括步骤:蜕膜组织采集、蜕膜组织进一步清洗、剪碎、消化、终止消化、过滤、单个核细胞获得、细胞贴壁、收集未贴壁细胞、MDSCs分离和流式检测。本发明使用较温和的Ⅳ型胶原酶进行原代消化分离,与胰酶相比,胶原酶仅对细胞间质有消化作用,避免了胰酶消化时对细胞膜蛋白的破坏作用;消化过程中加入I型DNA酶防止DNA导致的细胞凝集,且对细胞无损伤;通过使用CD33磁珠分选获得高纯度的CD33+MDSCs,与流式分选相比,磁珠分选可以在短时间内获得大量高纯度的细胞,操作简单,避免长时间操作对细胞活性的影响和污染几率的增加。
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种人蜕膜MDSCs的分离方法,该分离方法包括步骤:蜕膜组织采集、蜕膜组织进一步清洗、剪碎、消化、终止消化、过滤、单个核细胞获得、细胞贴壁、收集未贴壁细胞、MDSCs分离和流式检测。本发明使用较温和的Ⅳ型胶原酶进行原代消化分离,与胰酶相比,胶原酶仅对细胞间质有消化作用,避免了胰酶消化时对细胞膜蛋白的破坏作用;消化过程中加入I型DNA酶防止DNA导致的细胞凝集,且对细胞无损伤;通过使用CD33磁珠分选获得高纯度的CD33+MDSCs,与流式分选相比,磁珠分选可以在短时间内获得大量高纯度的细胞,操作简单,避免长时间操作对细胞活性的影响和污染几率的增加。
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