简介： 本发明公开了一种原位分离与固定依赖NADH和NADPH的耐盐氧化还原酶的方法。本发明在氧化石墨烯接枝上聚乙烯亚胺(PEI)后，由于PEI可提高氧化还原酶的稳定性，并可作为诱导生物矿化的模版。本发明中的温和固定化条件使得酶分子的天然构象和生物活性得到很好的保持，且固定化酶具有较高的机械强度。本发明利用PEI接枝的碳纳米材料对来源于海洋菌株的粗酶液进行不同盐浓度下的吸附和洗脱，发展从粗酶液中分离耐盐氧化还原酶并进行原位固定化的方法，可排除假阴性、假阳性的干扰，提高新酶筛选效率，并实现酶库有效构建，充分挖掘微生物的酶资源。