简介： 本发明涉及免疫学分析检测技术领域内一种基于Ag@Au的多孔结构的双信号纳米放大探针及其SPR免疫检测的方法。本发明首先以氯金酸为金源，硝酸银为银源，超纯水作为溶剂，过氧化氢为刻蚀溶剂，合成了多孔Ag@Au核壳纳米粒子复合材料，再利用MUA将Ag@Au核壳纳米粒子表面羧基功能化，然后将二级抗体（Ab₂）固定于其表面得到多孔结构的双信号放大探针p‑Ag@Au‑Ab₂。在采用该探针进行肿瘤标志物的SPR检测，在SPR的芯片表面固定一级抗体Ab₁，用牛血清蛋白封闭再结合检测抗原，并将p‑Ag@Au‑Ab₂与抗原结合，再通入苯胺和H₂O₂的混合溶液，多孔的p‑Ag@Au‑Ab₂核壳纳米粒子具有过氧化物酶模拟酶性质，可在SPR芯片表面催化H₂O₂氧化苯胺反应生成聚苯胺，形成二次SPR信号放大。