简介： 本发明属于生物传感器技术领域，具体涉及基于时间调控灵敏度的检测黄曲霉毒素B1的无标记比率电化学传感器的制备方法。本发明公开了一种无标记信号探针‑硫堇与还原氧化石墨烯(THI‑rGO)复合材料，通过硫堇(THI)与还原氧化石墨烯(rGO)的非共价作用形成；金纳米粒子(AuNPs)将巯基修饰的适配体互补链通过Au‑S共价键固定在传感界面；3’和5’末端被电化学活性分子Fc标记的适配体通过碱基互补配对作用固定在被修饰的传感界面，从而构建新型传感器。进一步，通过调控被Fc修饰的AFB1适配体与传感界面的cDNA作用时间，进而调控比率信号的比值(I_THI/I_Fc)，获得新型灵敏度可控的无标记比率电化学生物传感器，用于对实际样品AFB1的灵敏、快速分析。