简介： 本发明涉及一种N-磷酸化肽富集方法：经过β-消除去除肽段样品中O-磷酸化肽干扰，随后利用磁性介孔二氧化钛复合纳米材料富集样品中N-磷酸化修饰肽段。对于丝氨酸和苏氨酸的O-磷酸化修饰，通过碱性条件下的β-消除方法将其去除，形成稳定的脱氢丙氨酸和β-甲基脱氢丙氨酸。通过溶剂法合成四氧化三铁磁性纳米材料，溶胶凝胶法在其表面包覆二氧化钛，经过水热法扩孔得到磁性介孔二氧化钛纳米复合材料。该磁性介孔二氧化钛纳米复合材料能够在弱酸缓冲体系下的条件下对N-磷酸化肽进行特异性富集。这种β-消除结合特异性富集的方法用于样品中的N-磷酸化肽富集。