简介： 本发明公开了用于常温等温核酸大片段体外扩增的蛋白酶，包括（1）重组酶（SEQ?ID?No.35）；（2）单链结合蛋白（SEQ?ID?No.36）；（3）DNA聚合酶（SEQ?ID?No.37）；（4）辅助蛋白（SEQ?ID?No.38）。本发明还公开了用于常温等温核酸大片段体外扩增的试剂以及扩增方法。该扩增方法是一种利用多种工程酶与相关化学组分的协同作用，在常温且恒定温度的条件下，于体外快速完成核酸大片段的特异性扩增的方法。该方法今后可广泛应用于基因测序、环状质粒扩增与全基因组扩增等领域中，可在简化分子操作流程、提高研究进程等方面具有巨大的应用前景。