简介:
本发明涉及一种用固定化α-葡萄糖苷酶模型筛选活性天然药物的方法,属新药筛选化学工艺技术领域。本发明方法的特征在于具有以下过程和步骤:首先将α-葡萄糖苷酶固定化,制作α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选模型,用具有代表性的α-葡萄糖苷酶抑制剂阿卡波糖进行该筛选模型有效性验证;用固定化α-葡萄糖苷酶筛选模型筛选天然药物中药虎仗和血竭,其方法是将α-葡萄糖苷酶固定化,装入层析柱中,柱中加入pH6.8的磷酸钾缓冲液,构成筛选模型,于4℃保存;筛选时加入4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷及需筛选的中药虎仗或血竭,收集磷酸钾缓冲液柱洗脱液,然后用紫外分光光度计在400nm处测定其吸光度值,通过计算公式得其抑制率,并作出抑制剂浓度与相应抑制率的回归曲线,并于50%抑制率处得到半抑制率浓度IC50,以IC50值作为判断被筛选物质抑制活性的依据。
本发明涉及一种用固定化α-葡萄糖苷酶模型筛选活性天然药物的方法,属新药筛选化学工艺技术领域。本发明方法的特征在于具有以下过程和步骤:首先将α-葡萄糖苷酶固定化,制作α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选模型,用具有代表性的α-葡萄糖苷酶抑制剂阿卡波糖进行该筛选模型有效性验证;用固定化α-葡萄糖苷酶筛选模型筛选天然药物中药虎仗和血竭,其方法是将α-葡萄糖苷酶固定化,装入层析柱中,柱中加入pH6.8的磷酸钾缓冲液,构成筛选模型,于4℃保存;筛选时加入4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷及需筛选的中药虎仗或血竭,收集磷酸钾缓冲液柱洗脱液,然后用紫外分光光度计在400nm处测定其吸光度值,通过计算公式得其抑制率,并作出抑制剂浓度与相应抑制率的回归曲线,并于50%抑制率处得到半抑制率浓度IC50,以IC50值作为判断被筛选物质抑制活性的依据。