简介:
本发明的目的在于提供一种利用毕赤酵母菌表达抗菌肽T9W的方法。编码抗菌肽T9W的DNA序列,如SEQ ID No.1所示,并将该基因序列克隆到毕赤酵母表达载体pPICZαA中,构建重组表达载体pPICZαA‑T9W经双酶切及测序验证,验证正确后保存于E.coli Top 10。用电转化方法将质粒转入到毕赤酵母菌X‑33感受态细胞中,阳性转化子在诱导剂的作用下,实现抗菌肽的分泌表达。为进一步扩大发酵提供理论依据。本专利选用毕赤酵母作为抗菌肽T9W的表达宿主,完成了T9W的体外表达,本发明有效降低了抗菌肽T9W的生产成本,表达量高达13mg/L,实现了抗菌肽T9W的高效表达,克服了大规模生产中产量过低或化学合成成本过高的问题。
本发明的目的在于提供一种利用毕赤酵母菌表达抗菌肽T9W的方法。编码抗菌肽T9W的DNA序列,如SEQ ID No.1所示,并将该基因序列克隆到毕赤酵母表达载体pPICZαA中,构建重组表达载体pPICZαA‑T9W经双酶切及测序验证,验证正确后保存于E.coli Top 10。用电转化方法将质粒转入到毕赤酵母菌X‑33感受态细胞中,阳性转化子在诱导剂的作用下,实现抗菌肽的分泌表达。为进一步扩大发酵提供理论依据。本专利选用毕赤酵母作为抗菌肽T9W的表达宿主,完成了T9W的体外表达,本发明有效降低了抗菌肽T9W的生产成本,表达量高达13mg/L,实现了抗菌肽T9W的高效表达,克服了大规模生产中产量过低或化学合成成本过高的问题。