简介： 本发明公开了一种碱基修饰核苷酸的合成方法及其用途；所述方法包括将各种修饰核苷在磷酸化试剂的作用下，选择性地生成5′-核苷三磷酸；这些磷酸化试剂包括反应过程中原位生成的环状磷酸化试剂以及三氯氧磷和三丁基焦磷酸铵协同作用下的反应产物。本发明合成的碱基修饰核苷酸在DNA测序、标记、延伸等生物学领域广泛使用，目前其销售价格很高，合成方法复杂，反应选择性差，副反应多，不好分离纯化；而本发明提供的合成方法选择性好，副反应少，容易分离纯化，且所需实验条件易得，合成过程均为常规化学反应，可用于大规模推广使用。