简介： 本发明涉及生物化学技术领域，公开了一种比率型荧光探针及其制备方法与应用，所述比率型荧光探针的通式如式(1)所示：式中，R₁为甲基，R₂选自4‑甲基吡啶、甲基，R₃选自N,N‑二乙基、4‑甲基哌嗪，X为卤素。该探针具有对核酸的选择性比率荧光反应，理想的生物相容性，使用该探针首次在活细胞中实现了核酸的原位实时比率型荧光成像，成功地监测了活细胞有丝分裂间期核酸的变化，以及凋亡细胞中染色质的聚集和分离；通过该探针对组织切片中的核酸进行比率荧光成像，可以获得核酸含量和分布的详细信息。