猪小肠上皮细胞表达的PGC启动子及其应用
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猪小肠上皮细胞表达的PGC启动子及其应用
来源:北方有色网
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简介: 本发明提供了一种猪小肠上皮细胞表达的PGC启动子及其应用,该PGC启动子核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,本发明通过在线网站预测PGC可靠启动子区;化学合成方法合成引物;通过限制性酶切位点MluⅠ和NheⅠ,将PGC启动子序列插入pGL3‑Basic载体,得到PGC‑双荧光素酶重组质粒;转染大肠杆菌进行质粒扩增,提取质粒,测序验证;转染入猪小肠上皮细胞,发现猪源PGC启动子可在猪小肠上皮细胞中启动双荧光素酶基因表达,说明所述启动子能够调控下游基因在猪小肠上皮细胞中表达,有利于构建稳定高效的小肠转录调控元件,在制备转基因动物和小肠疾病基因治疗研究中具有应用价值。
本发明提供了一种猪小肠上皮细胞表达的PGC启动子及其应用,该PGC启动子核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,本发明通过在线网站预测PGC可靠启动子区;化学合成方法合成引物;通过限制性酶切位点MluⅠ和NheⅠ,将PGC启动子序列插入pGL3‑Basic载体,得到PGC‑双荧光素酶重组质粒;转染大肠杆菌进行质粒扩增,提取质粒,测序验证;转染入猪小肠上皮细胞,发现猪源PGC启动子可在猪小肠上皮细胞中启动双荧光素酶基因表达,说明所述启动子能够调控下游基因在猪小肠上皮细胞中表达,有利于构建稳定高效的小肠转录调控元件,在制备转基因动物和小肠疾病基因治疗研究中具有应用价值。
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标签:化学分析
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