简介： 本发明公开了一种基于生物正交反应的定向抗体固定化方法，包括以下步骤，引入具有生物正交反应活性的酶作为标签，与需要固定的抗体通过融合的方式连接得到融合酶标签的抗体。高纯度的融合酶标签的抗体进一步和烷基卤脱卤酶底物6‑氯己烷反应形成共价键，制备成表面功能化的载体表面。将带有烷基卤脱卤酶标签的抗体溶液与修饰有烷基卤脱卤酶底物的固相载体表面共同孵育，通过烷基卤脱卤酶与底物6‑氯己烷的生物正交反应实现抗体功能化固相载体表面的一步共价键固定化。应用生物正交反应的高特异性，通过共价键固定目标抗体，实现固定化的定向性和不可逆性，在不同的化学、物理环境中保持了高稳定性，能够应用于复杂生物体系的检测和样品亲和纯化。