简介： 本发明公开了一种玉米AGPase磷酸化鉴定方法，涉及生物化学与分子生物学领域，步骤为：AGPase亚基蛋白Sh2和Bt2抗体的制备，AGPase亚基Sh2和Bt2抗体的特异性验证，授粉后15天、20天和27天玉米胚乳蛋白的提取，授粉后15天、20天和27天玉米胚乳磷酸化蛋白的富集，授粉后15天、20天和27天玉米籽粒磷酸化蛋白的检测和验证；本发明在制备好抗体后，结合Phos‑tag技术具有快速确定AGPase酶是否发生磷酸化的优势，并且不需要进行质谱，因而成本低。并且此方法只要有特异的相应蛋白抗体，具有推广到鉴定任意一种蛋白磷酸化的鉴定上，因此具有蛋白质磷酸化鉴定的广泛应用。