简介:
一种高效的植物双元诱导基因表达重组质粒,由以下步骤实现:构建受生长素IAA诱导的DR5启动子,以此启动子启动酵母转录激活蛋白Gal4的BD结构域表达;构建受低温诱导的启动子,以此启动子启动酵母转录激活蛋白Gal4的AD结构域表达;构建受Gal4激活的启动子,以此启动报告基因GFP的表达;将上述三个表达段导入同一个植物表达载体pBI121,即可。本发明需要两个诱导条件同时存在时才能诱导报告基因表达,减少干扰;同时,本发明利用Gal4/UAS系统基本原理,实现了诱导信号的两级放大,可以提高诱导信号的检测灵敏度;另外,本发明还具有很大的灵活性和延伸性,多种响应化学信号、物理信号的DNA元件都可以用于构建双元诱导表达系统,可以广泛应用于现代遗传学和分子生物学的研究。
一种高效的植物双元诱导基因表达重组质粒,由以下步骤实现:构建受生长素IAA诱导的DR5启动子,以此启动子启动酵母转录激活蛋白Gal4的BD结构域表达;构建受低温诱导的启动子,以此启动子启动酵母转录激活蛋白Gal4的AD结构域表达;构建受Gal4激活的启动子,以此启动报告基因GFP的表达;将上述三个表达段导入同一个植物表达载体pBI121,即可。本发明需要两个诱导条件同时存在时才能诱导报告基因表达,减少干扰;同时,本发明利用Gal4/UAS系统基本原理,实现了诱导信号的两级放大,可以提高诱导信号的检测灵敏度;另外,本发明还具有很大的灵活性和延伸性,多种响应化学信号、物理信号的DNA元件都可以用于构建双元诱导表达系统,可以广泛应用于现代遗传学和分子生物学的研究。