简介： 本发明公开了一种核酸扩增反应引物的设计方法，确定引物的目标序列和非目标序列；针对目标序列设计单条引物；引物序列比对；将单条引物组合成引物组；对引物组进行物理化学性质、通用性以及特异性检测和判定；输出引物组，即得到所述核酸扩增反应引物。本发明充分运用了基因组学数据以及相关方法、工具，实现针对目标基因或区域、目标基因组的高效率引物设计，获得高通用性且高特异性的引物。