简介： 本发明公开了一种新型反相/弱阳离子交换混合模式色谱固定相及其制备方法。所述反相/弱阳离子交换混合模式色谱固定相的结构式如式Ⅰ所示。所述反相/弱阳离子交换混合模式色谱固定相的制备方法包括如下步骤：1)乙烯基硅烷偶联剂与球形硅胶表面的硅羟基经硅烷偶联反应，得到式Ⅱ所示化合物；2)式Ⅱ所示化合物与半胱氨酸经巯基‑烯点击化学反应，得到式Ⅲ所示化合物；3)式Ⅲ所示化合物与异氰酸十八酯反应经氨基与异氰酸基团之间的反应即得。由于本发明反相/弱阳离子交换混合模式色谱固定相键合有亲水性基团，使其疏水性减弱，因此能够解决肽段疏水性太强而引起的不可逆吸附的问题，使蛋白质组的定性定量分析结果更加准确。