简介： 本发明公开了一种体外培养制备AFP单克隆抗体的方法，首先复苏杂交瘤细胞，制备种子细胞；将无菌的中空纤维系统内循环系统的进液端和PBS/培养基供应瓶连接，出液端和废液瓶连接，将中空纤维系统外循环系统的进液端和PBS/培养基供应瓶连接，出端和废液瓶连接用PBS和培养基对其进行润洗；然后将种子细胞导入；培养过程中持续进行葡萄糖和乳酸的监测，去除代谢废物，同时不断补充新鲜的培养基，采用20L桶进行培养基的储备，减少操作频次；收获的培养上清进行亲和纯化后得到抗体浓度5mg/mL，纯度95%以上的单抗成品。本发明制备的单抗特异性好，灵敏度高且效价高，用于AFP化学发光检测试剂盒中，能大大提高试剂盒的灵敏度、特异性和稳定性。