简介： 本发明公开了一种RNA 4‑巯基尿嘧啶特异标记方法及其应用，属于核酸化学技术领域，本发明方法利用水合肼对RNA 4‑巯基尿苷进行加成消除的反应机理,在温和的条件下生成了类似于胞嘧啶(C)的结构，RNA在逆转录的过程中原来4sU的位置上发生的A:T配对变为C:G配对，从而对4sU的位置进行单碱基识别。此方法结合测序技术可用于检测天然存在的4sU的位置和研究转录组的动态。