简介： 本发明公开了一种抗体取向修饰的荧光微球探针的制备方法，可实现抗体在微球表面高效、取向、牢固地固定，使Fab端充分暴露且保持生物活性。该荧光微球探针的制备方法包括：活化羧基微球表面的羧基基团，化学偶联固定蛋白A或蛋白G，特异性结合抗体的Fc端，进而通过化学键将抗体不可逆地固定在蛋白A或蛋白G基底上，最后偶联荧光分子。本发明还提供了上述荧光微球探针在免疫层析中的应用，可显著提高检测的灵敏度和试纸条的稳定性。