简介： 本发明涉及一种蛋白发酵生产方法,其为一种重组大肠杆菌发酵过程中蛋白渗漏与热分离相结合的集成化生产方法。本发明成功地将化学渗漏法直接应用于发酵过程中,实现了菌体生长和重组蛋白选择性渗漏协调地进行。重组蛋白渗漏不仅简化了纯化重组蛋白的工艺,也提高了目标产物的表达水平。同时,选用优化的培养基组成,针对热稳定性重组蛋白(如目标蛋白和硫氧还蛋白的融合蛋白)产物,在发酵过程结束时加热后再离心。热处理不仅进一步促使蛋白的渗漏,而且使相当多的杂蛋白、核酸等变性后沉淀下去。经检测,超过90%的重组蛋白渗漏到培养基中,且离心后上清液中重组蛋白的纯度可达60%～70%。