简介： 本发明属生物技术领域,具体涉及一种兼具抗凝血酶活性和抗血小板聚集活性的双功能水蛭素(Bifunctional RecombinantHirudin)的蛋白质结构和制备方法及其应用。根据对野生型水蛭素的结构及其生化特性的分析,设计了新型双功能水蛭素分子结构。化学合成突变体基因,然后与真核表达载体pPIC9K重组,转化甲醇营养型酵母GS115,筛选高表达工程菌。工程菌经发酵扩增,离心收集上清液,经三步法纯化双功能水蛭素。所得产品冻干后,具有抗凝血酶活性并能显著抑制ADP诱导的血小板聚集,对于预防血栓性疾病的发生有明显的作用。