简介： 本发明涉及生物组织的微观观察技术领域内一种观察微小组织内细胞立体分布及统计细胞数目的方法，将获取的待观察组织材料进行表面清洗后依次进行化学固定、脱水处理、免疫荧光染色和透明化处理；再将组织材料连同透明液移至共聚焦显微镜专用培养皿，用激光共聚焦显微镜进行逐层扫描拍照，获得整体组织各层的细胞分布图像，进行细胞立体分布的观察，再通过Imaris软件处理各层细胞分布图像数据，重建细胞组织的三维模型，观察三维立体模型中被免疫荧光标记细胞的立体分布，再利用Imaris Bitplane Spot检测分析，计算出免疫荧光标记细胞的准确数目。本发明的方法保持了待观察组织的完整性，而且观察细胞分布的清晰度和准确度都高，细胞的数目统计结果更准确。