调控丹参酮合成的SmAP2/ERF152基因的克隆引物、功能及应用
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调控丹参酮合成的SmAP2/ERF152基因的克隆引物、功能及应用
来源:北方有色网
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简介: 本发明公开了丹参中一条参与调控丹参酮合成的AP2/ERF转录因子SmAP2/ERF152的编码基因序列;本发明提供的SmAP2/ERF152基因具有SEQ ID No.1所示核苷酸序列,所述基因编码蛋白质具有SEQ ID No.2所示氨基酸序列。本发明检测了SmAP2/ERF152在丹参植株中的表达情况,发现其在丹参根和根的周皮部高丰度表达;亚细胞定位实验表明SmAP2/ERF152定位于细胞核;转录激活实验表明SmAP2/ERF152具有转录激活活性;构建了SmAP2/ERF152‑RNAi载体及SmAP2/ERF152‑过表达(SmAP2/ERF152‑oe)载体,通过发根农杆菌介导的丹参遗传转化获得转基因毛状根阳性株系;化学检测分析发现,在SmAP2/ERF152‑RNAi株系中,隐丹参酮和丹参酮IIA含量降低,而在SmAP2/ERF152‑oe株系中,隐丹参酮和丹参酮IIA的含量显著升高。本发明提供的SmAP2/ERF152具有正向调控丹参酮生物合成的功能,为利用生物技术提高丹参酮类化合物含量奠定基础。
本发明公开了丹参中一条参与调控丹参酮合成的AP2/ERF转录因子SmAP2/ERF152的编码基因序列;本发明提供的SmAP2/ERF152基因具有SEQ ID No.1所示核苷酸序列,所述基因编码蛋白质具有SEQ ID No.2所示氨基酸序列。本发明检测了SmAP2/ERF152在丹参植株中的表达情况,发现其在丹参根和根的周皮部高丰度表达;亚细胞定位实验表明SmAP2/ERF152定位于细胞核;转录激活实验表明SmAP2/ERF152具有转录激活活性;构建了SmAP2/ERF152‑RNAi载体及SmAP2/ERF152‑过表达(SmAP2/ERF152‑oe)载体,通过发根农杆菌介导的丹参遗传转化获得转基因毛状根阳性株系;化学检测分析发现,在SmAP2/ERF152‑RNAi株系中,隐丹参酮和丹参酮IIA含量降低,而在SmAP2/ERF152‑oe株系中,隐丹参酮和丹参酮IIA的含量显著升高。本发明提供的SmAP2/ERF152具有正向调控丹参酮生物合成的功能,为利用生物技术提高丹参酮类化合物含量奠定基础。
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标签:化学分析
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