简介： 本发明涉及非‑FRET肉毒梭菌测定法。包含人工构建体的组合物，所述构建体具有(a)含报道物的部分，其化学偶联到(b)切割位点。所述切割位点以从所述构建体的剩余部分切割含报道物的部分的方式与研究的物质相互作用。所切割的部分被局部环境破坏或另外降解，并通过降低来自报道物的信号而证实研究的物质的存在。所述研究的物质优选地是肉毒梭菌毒素(BoTN)，所述切割序列是SNARE蛋白的全部或部分。所述可切割的含报道物的部分优选地是黄色荧光蛋白(YFP)、Citrine、Venus或YPet蛋白。