简介:
本发明提供了一种链霉亲和素标记微球的生物素化抗体结合量的测定方法,包括以下步骤:1)生物素化抗体的制备:2mg的抗体用PBS缓冲液稀释至5mg/ml,加入一定量的sulfo‑NHS‑LC‑Biotin,摇匀后室温反应1小时,透析纯化;2)吖啶酯‑生物素化抗体的制备:步骤1)中的生物素化抗体稀释至2mg/ml,加入一定量的吖啶酯的DMSO溶液,摇匀后室温避光反应2小时,避光透析纯化并用BCA法进行定量;3)绘制标准曲线,读取发光值RLU;绘制吖啶酯‑生物素化抗体加入质量‑RLU关系曲线。本发明的优点为:采用化学发光法,较荧光法灵敏度更高,抗干扰能力更强,比测试微球复合物操作更简单,结果更准确。
本发明提供了一种链霉亲和素标记微球的生物素化抗体结合量的测定方法,包括以下步骤:1)生物素化抗体的制备:2mg的抗体用PBS缓冲液稀释至5mg/ml,加入一定量的sulfo‑NHS‑LC‑Biotin,摇匀后室温反应1小时,透析纯化;2)吖啶酯‑生物素化抗体的制备:步骤1)中的生物素化抗体稀释至2mg/ml,加入一定量的吖啶酯的DMSO溶液,摇匀后室温避光反应2小时,避光透析纯化并用BCA法进行定量;3)绘制标准曲线,读取发光值RLU;绘制吖啶酯‑生物素化抗体加入质量‑RLU关系曲线。本发明的优点为:采用化学发光法,较荧光法灵敏度更高,抗干扰能力更强,比测试微球复合物操作更简单,结果更准确。