简介： 本发明公开了一种基于磁性纳米材料和生物信号放大技术测定T4多聚核苷酸激酶活性的方法，采用水热法制备Fe₃O₄@TiO₂磁性核壳纳米粒子，ATP和T4 PNK存在时，滚环扩增反应引物链S1的5′端磷酸化，修饰到Fe₃O₄@TiO₂磁性纳米粒子表面；加入环形模板S2，核酸链S2与Fe₃O₄@TiO₂磁性纳米粒子表面引物链S1杂交形成环形混合物；Fe₃O₄@TiO₂磁性纳米粒子表面发生RCA反应；加入二茂铁标记的核酸链S3，Fc‑S3与RCA反应产物杂交，被修饰到磁性纳米粒子表面，增强电化学响应信号；通过GME的磁性富集和电化学响应信号，实现对T4 PNK活性的高灵敏和定量测定。