荧光测定DNA连接酶活性的方法
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荧光测定DNA连接酶活性的方法
来源:北方有色网
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简介: 本发明属于分子生物学技术领域,根据DNA连接酶把小片段的DNA连接为大片段的DNA时,DNA片段的熔点(Tm值)发生了变化,改变了原茎环结构的DNA构象,形成G‑四联体(鸟嘌呤‑四联体),G‑四联体可结合硫代黄素T后在490 nm处发出荧光,从而检测DNA连接酶的活性。本方法无需放射性同位素的使用,也不需要合成昂贵的含荧光基团的DNA,也不用电泳胶,操作快速简便。不仅可以快速对DNA连接酶活力定量,也可以研究各种不同化学物对DNA连接酶活性的影响。
本发明属于分子生物学技术领域,根据DNA连接酶把小片段的DNA连接为大片段的DNA时,DNA片段的熔点(Tm值)发生了变化,改变了原茎环结构的DNA构象,形成G‑四联体(鸟嘌呤‑四联体),G‑四联体可结合硫代黄素T后在490 nm处发出荧光,从而检测DNA连接酶的活性。本方法无需放射性同位素的使用,也不需要合成昂贵的含荧光基团的DNA,也不用电泳胶,操作快速简便。不仅可以快速对DNA连接酶活力定量,也可以研究各种不同化学物对DNA连接酶活性的影响。
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标签:化学分析
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