简介： 本发明提供肠道类器官的培养方法，包括如下步骤：1)小鼠肠道隐窝分离；2)肠道类器官的培养。本发明属于生物安全检测与评估技术领域，本发明通过对馏分和接种密度确定等进行了明确化质量控制和条件优化，提供一种可克服主观性偏差、提高类器官形成率的肠道类器官的培养方法，并进一步提供肠道类器官在化学物肠道毒性测试中的应用和相应地测试方法。