简介： 本发明涉及一种测定血清中双特异性抗体BsAb的ELISA方法及应用，属于化学技术领域。本发明的方法包括以下步骤，1)用抗人hOX40(Fc Tag)抗原包微孔板，得到包被后的微孔板；2)将BsAb和待测样品加入抗体包被的微孔板中孵育结合，形成抗原‑抗体复合物；3)将hPD‑L1(his Tag)加入所述抗体包被的微孔板中与抗原‑抗体复合物孵育结合，形成抗原‑抗体‑检测抗体复合物；4）将Anti‑His HRP标记的亲和素加入所述抗体包被的微孔板中与抗原‑抗体‑检测抗体复合物孵育结合，形成抗原‑抗体‑检测抗体‑HRP标记的亲和素复合物，加入底物显色；5)加入终止液终止反应，测定OD值；6)通过BsAb标准曲线计算待测样品在血清中BsAb浓度。本发明的有益效果是：检测灵敏度高、误差小、特异性高。