简介： 本发明涉及DNA自组装膜技术领域，具体涉及一种基于酶水解能力的基片表面HP DNA发卡构型的定量评测及消除背景信号的方法。具体步骤包括：通过高温变性去除二聚体；将基片浸入酶量为100U～300U的核酸外切酶I缓冲液中水解；利用电量积分技术确定电极表面HP DNA发卡构型的比例。本发明基于核酸外切酶I对ssDNA和HP DNA发卡构型水解能力的差异，结合电化学方法定量评测基片表面HP DNA发卡构型的比例。此外，核酸外切酶I的使用还可有效消除由非发卡构型引起的背景信号，从而极大的提高Hairpin DNA基生物传感器的检测灵敏度。