简介： 本发明公开了一种基于荧光素酶亚基互补的主蛋白酶抑制剂活性检测系统及在药物筛选中的应用，将含有蛋白酶酶切位点的多肽序列插入到荧光素酶的两个亚基之间。在蛋白酶没有活性的情况下，荧光素酶两个亚基相互作用的完整性得到保护，因此整个结构具有荧光素酶活性，可以催化化学底物发出荧光。在蛋白酶表现出活性的情况下，连接荧光素酶两个亚基之间的蛋白酶酶切位点的多肽序列被蛋白酶切断，亚基相互作用的完整性被破坏，荧光素酶不再具有荧光素酶活性。据此可以评价主蛋白酶在各种化合物影响下的活性，进而推断化合物对主蛋白酶活性的抑制能力。