简介:
本发明涉及饮用水领域,具体涉及一种矿泉水中微量大肠杆菌的检测方法。本发明PCR扩增得到PPK、ADK基因,插入表达载体pET28a(+)中构建重组表达质粒pET28a(+)‑PPKADK,表达PPK‑ADK融合蛋白,利用表面包裹聚胺醇的磁珠,通过化学反应将腺苷酸双磷酸酶固定于磁珠表面,制备固相腺苷酸双磷酸酶,用于除去与融合蛋白结合的内源性ADP,降低ATP扩增反应的背景,从而使之与生物发光反应相结合,可以快速有效的测定微量外源ATP及细菌菌落数,矿泉水中经过杀菌消毒,只含有微量的大肠杆菌。
本发明涉及饮用水领域,具体涉及一种矿泉水中微量大肠杆菌的检测方法。本发明PCR扩增得到PPK、ADK基因,插入表达载体pET28a(+)中构建重组表达质粒pET28a(+)‑PPKADK,表达PPK‑ADK融合蛋白,利用表面包裹聚胺醇的磁珠,通过化学反应将腺苷酸双磷酸酶固定于磁珠表面,制备固相腺苷酸双磷酸酶,用于除去与融合蛋白结合的内源性ADP,降低ATP扩增反应的背景,从而使之与生物发光反应相结合,可以快速有效的测定微量外源ATP及细菌菌落数,矿泉水中经过杀菌消毒,只含有微量的大肠杆菌。