多器官细胞基因突变检测基因编辑小鼠模型的构建及应用
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多器官细胞基因突变检测基因编辑小鼠模型的构建及应用
来源:北方有色网
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简介: 本发明提供一种CD59基因编辑小鼠模型,它是定点敲入CD59‑增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达序列片段的小鼠。本发明还提供构建CD59‑EGFP基因编辑小鼠模型的方法,是利用CRISPR‑Cas9基因编辑技术在小鼠基因ROSA26位点定点敲入CD59‑EGFP基因序列的方法,包括:设计并获得向导RNA,制备向导RNA与Cas9蛋白混合物;构建CD59‑EGFP打靶载体;显微共注射与F0代小鼠获得,F1代小鼠获得;CD59‑EGFP打靶载体中,CD59的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,EGFP的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的基因编辑小鼠模型对致突变化学物有应答,分离其肝细胞、生殖细胞,在荧光显微镜下通过绿色荧光可以显示CD59胞膜定位,可用于化学物的多器官细胞致突变性检测。
本发明提供一种CD59基因编辑小鼠模型,它是定点敲入CD59‑增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达序列片段的小鼠。本发明还提供构建CD59‑EGFP基因编辑小鼠模型的方法,是利用CRISPR‑Cas9基因编辑技术在小鼠基因ROSA26位点定点敲入CD59‑EGFP基因序列的方法,包括:设计并获得向导RNA,制备向导RNA与Cas9蛋白混合物;构建CD59‑EGFP打靶载体;显微共注射与F0代小鼠获得,F1代小鼠获得;CD59‑EGFP打靶载体中,CD59的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,EGFP的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的基因编辑小鼠模型对致突变化学物有应答,分离其肝细胞、生殖细胞,在荧光显微镜下通过绿色荧光可以显示CD59胞膜定位,可用于化学物的多器官细胞致突变性检测。
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标签:化学分析
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