基于荧光定量PCR技术的快速检测大肠杆菌含量的方法
基于荧光定量PCR技术的快速检测大肠杆菌含量的方法
来源:北方有色网
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简介:
基于荧光定量PCR技术的快速检测大肠杆菌含量的方法。本发明以大肠杆菌LacZ基因为检测靶基因,通过化学合成方法合成得到一定质量的具有多个核苷酸的标准靶序列,将一定质量的靶序列所含分子数量,定量后稀释得到LacZ基因系列浓度标准品,以LacZ基因系列浓度标准品和待测样品DNA为模板,利用特异性引物进行实时荧光定量PCR,绘制标准曲线,通过标准曲线和待测样品的Ct值判定结果。同时,根据大肠杆菌LacZ基因特异性片段序列设计并合成一组特异性引物,优化PCR反应条件,建立以实时荧光定量聚合酶链反应为平台的检测方法,并对所建立的方法进行评估。
基于荧光定量PCR技术的快速检测大肠杆菌含量的方法。本发明以大肠杆菌LacZ基因为检测靶基因,通过化学合成方法合成得到一定质量的具有多个核苷酸的标准靶序列,将一定质量的靶序列所含分子数量,定量后稀释得到LacZ基因系列浓度标准品,以LacZ基因系列浓度标准品和待测样品DNA为模板,利用特异性引物进行实时荧光定量PCR,绘制标准曲线,通过标准曲线和待测样品的Ct值判定结果。同时,根据大肠杆菌LacZ基因特异性片段序列设计并合成一组特异性引物,优化PCR反应条件,建立以实时荧光定量聚合酶链反应为平台的检测方法,并对所建立的方法进行评估。
标签:化学分析
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