简介： 本发明属于化学检测技术领域，公开了一种血清中25羟基维生素D的检测方法。所述检测方法采用液相色谱串联质谱进行检测，所述液相色谱的条件包括：色谱柱为UPLC ACQUITYTM HSS PFP column；流动相A为0.1％‑0.5％甲酸水溶液，流动相B为甲醇。该方法特异性强、准确度高，适用于各年龄段人群血清样本中25羟基维生素D的检测。