简介： 本发明属于生物化学技术领域，具体涉及一种TGFβR1(T204D)酶活性的快速检测方法及其应用。检测方法为：(1)取待测样品、空白对照品、阳性对照品分别与TGFβR1(T204D)酶、TGFβR1底物/ATP混合液共孵育进行激酶反应产生ADP；(2)向步骤(1)的三组激酶反应体系中分别添加ADP‑Glo^TM反应试剂共孵育，终止激酶反应并消耗完剩余ATP；(3)向步骤(2)的三组反应体系中分别添加激酶检测试剂共孵育，使ADP转化成ATP，并读取新合成的ATP的发光值RLU；(4)按酶活＝(RLU(Sample)‑RLU(Blank))/(RLU(Pos.Ctrl)‑RLU(Blank))×100％计算TGFβR1(T204D)酶活。该方法基于ADP‑Glo^TM激酶实验，直接测定反应中消耗的ATP来定量反应的进程。完成全部实验只需一天，大大缩短了检测时间。该方法可应用于TGFβR1(T204D)受体抑制剂和此靶点相关的抗肿瘤药物的筛选。