简介:
本发明涉及DNA模板的无细胞体外转录方法,该DNA模板包括至少受一种基因调节元件控制的待转录的DNA序列,该方法包括:a)为了转录而应用浓缩的和适当的话纯化的细胞核提取物,合适的话该提取物可被转录因子和/或辅因子补充或者部分或全部地置换,和至少一种标记的核苷酸,b)合适的话,在转录之后分离和/或降解反应混合物中的蛋白质,c)将标记的转录物与固体基质结合,d)除去过剩的标记核苷酸和e)测定标记的转录物量。本发明还涉及该方法所用的DNA模板及其应用。
本发明涉及DNA模板的无细胞体外转录方法,该DNA模板包括至少受一种基因调节元件控制的待转录的DNA序列,该方法包括:a)为了转录而应用浓缩的和适当的话纯化的细胞核提取物,合适的话该提取物可被转录因子和/或辅因子补充或者部分或全部地置换,和至少一种标记的核苷酸,b)合适的话,在转录之后分离和/或降解反应混合物中的蛋白质,c)将标记的转录物与固体基质结合,d)除去过剩的标记核苷酸和e)测定标记的转录物量。本发明还涉及该方法所用的DNA模板及其应用。