荧光抗体标记的Vero细胞定量检测EMC病毒滴度的方法
荧光抗体标记的Vero细胞定量检测EMC病毒滴度的方法
来源:北方有色网
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简介:
本发明涉及一种荧光抗体标记的Vero细胞定量检测EMC病毒滴度的方法,利用经过带有荧光蛋白的Cy5基因标记的重组质粒,经过化学转染试剂lipofetamine 2000的转染进入到Vero细胞内部,再经过筛选使之产生荧光蛋白高表达的稳定细胞株,然后用于EMC病毒滴度检测,细胞病变在荧光显微镜下呈现出不同的荧光效果及可以用软件计算荧光强度来客观判定病毒的滴度。所述的Vero细胞与lipofetamine 2000转染试剂购自中科院和Thermo Fisher Scientific公司。所述的荧光强度记录通过Image软件生成。本发明可以科学的按照客观性的结果来统计分析病毒滴度,计算生物制品在病毒去除/灭活工艺上的下降值,排除了检测人员人为的观察误差,更好的符合国际、国内的cGMP/GLP对生物制品在质量检测时方法学的准确性。
本发明涉及一种荧光抗体标记的Vero细胞定量检测EMC病毒滴度的方法,利用经过带有荧光蛋白的Cy5基因标记的重组质粒,经过化学转染试剂lipofetamine 2000的转染进入到Vero细胞内部,再经过筛选使之产生荧光蛋白高表达的稳定细胞株,然后用于EMC病毒滴度检测,细胞病变在荧光显微镜下呈现出不同的荧光效果及可以用软件计算荧光强度来客观判定病毒的滴度。所述的Vero细胞与lipofetamine 2000转染试剂购自中科院和Thermo Fisher Scientific公司。所述的荧光强度记录通过Image软件生成。本发明可以科学的按照客观性的结果来统计分析病毒滴度,计算生物制品在病毒去除/灭活工艺上的下降值,排除了检测人员人为的观察误差,更好的符合国际、国内的cGMP/GLP对生物制品在质量检测时方法学的准确性。
标签:化学分析
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