简介： 本发明公开了一种基于高精度质谱的蛋白类泛素化修饰位点检测方法及应用，所述蛋白类泛素化修饰位点检测方法包括以下步骤：步骤S1：构建获得体外SUMO化修饰反应体系，以获得目标蛋白；步骤S2：对步骤S1所获得的目标蛋白进行胰蛋白酶酶切，获得酶切后的多肽肽段；步骤S3：将步骤S2获得的多肽通过液相色谱质谱联用分析采集得到多肽质谱数据，经数据解析，得到修饰位点以及核心肽段的序列；步骤S4：化学合成含有SUMO化修饰位点的同位素标记肽段序列，采用PRM方法进行位点确证，确定一套母‑子离子对；步骤S5：用步骤S4建立的母‑子离子对对内源修饰位点进行检测；所述SUMO化修饰是指SUMO1类泛素化修饰。