简介： 本发明属于分析化学技术领域，提供了艾塞那肽的前处理及其得到的His氨基酸洗脱液中异构体的检测方法。本发明将待测艾塞那肽进行水解和氨基酸分离，收集His氨基酸洗脱液；利用高效液相色谱对所述His氨基酸洗脱液进行手性分析；所述高效液相色谱的条件包括：色谱柱：CROWNPAKCR(+)150*4.0mm 5μm；流动相：pH值为1.0的高氯酸水溶液。本发明先将艾塞那肽进行水解，得到氨基酸混合物，再利用高效液相色谱分离将氨基酸混合物中的His氨基酸进行分离，得到His氨基酸洗脱液，前处理方法操作简单；再通过控制色谱柱类型和流动相组成，实现了His氨基酸中不同异构体的分离和测定，且数据重现性好。