核酸恒温扩增定量检测方法
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核酸恒温扩增定量检测方法
来源:北方有色网
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简介: 本发明属于微生物检测技术领域,具体涉及一种核酸恒温扩增定量检测方法。基于环介导等温扩增方法,在反应体系内添加聚丙烯酰胺或海藻糖,以目标基因拷贝数为横坐标、光强度曲线拐点的时间为纵坐标,拟合得到基因拷贝数与曲线拐点的时间的关系曲线,即标准曲线;根据标准曲线和曲线拐点的时间得到定量检测数据。本发明在建立的病毒和细菌的现场快速高灵敏检测技术的基础上,通过对目标基因不同拷贝数检测光强度曲线的研究,确定基因拷贝数与曲线拐点时间关系的定量曲线,并在反应体系内添加一些表面活性剂或提高体系黏度和热稳定性的化学制剂,来分析它们与定量的相关性,优化定量曲线,最终实现病原的快速简便、灵敏特异和定量的检测。
本发明属于微生物检测技术领域,具体涉及一种核酸恒温扩增定量检测方法。基于环介导等温扩增方法,在反应体系内添加聚丙烯酰胺或海藻糖,以目标基因拷贝数为横坐标、光强度曲线拐点的时间为纵坐标,拟合得到基因拷贝数与曲线拐点的时间的关系曲线,即标准曲线;根据标准曲线和曲线拐点的时间得到定量检测数据。本发明在建立的病毒和细菌的现场快速高灵敏检测技术的基础上,通过对目标基因不同拷贝数检测光强度曲线的研究,确定基因拷贝数与曲线拐点时间关系的定量曲线,并在反应体系内添加一些表面活性剂或提高体系黏度和热稳定性的化学制剂,来分析它们与定量的相关性,优化定量曲线,最终实现病原的快速简便、灵敏特异和定量的检测。
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标签:化学分析
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