人血浆DNA中RASSF1A基因甲基化定量检测方法
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人血浆DNA中RASSF1A基因甲基化定量检测方法
来源:北方有色网
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简介: 本发明涉及一种对人血浆DNA中RASSF1A基因甲基化的定量检测方法。本发明取静脉血后得血浆,制备血浆DNA标准曲线样品,提取待测血浆DNA、标准品血浆DNA和健康人血浆DNA,对血浆DNA、标准品血浆DNA和健康人血浆DNA化学修饰,针对人RASSF1A基因启动子区中565号CpG位点设计特异性引物和Taqman荧光探针荧光定量MSP扩增体系,以标准品血浆DNA的扩增结果制定外标准曲线,对待测样本进行定量结果分析。解决了手术治疗的肿瘤患者病程多数已经处于中晚期,手术标本的获取创伤性大,甲基化的检出率也相对较低等缺陷。具有灵敏度高、最低检出限是1.5×102拷贝/ml,检测针对RASSF1A基因启动子区中第565号CpG位点,特异性强、获取容易、创伤性小,能够定量检测血浆DNA中RASSF1A基因甲基化。
本发明涉及一种对人血浆DNA中RASSF1A基因甲基化的定量检测方法。本发明取静脉血后得血浆,制备血浆DNA标准曲线样品,提取待测血浆DNA、标准品血浆DNA和健康人血浆DNA,对血浆DNA、标准品血浆DNA和健康人血浆DNA化学修饰,针对人RASSF1A基因启动子区中565号CpG位点设计特异性引物和Taqman荧光探针荧光定量MSP扩增体系,以标准品血浆DNA的扩增结果制定外标准曲线,对待测样本进行定量结果分析。解决了手术治疗的肿瘤患者病程多数已经处于中晚期,手术标本的获取创伤性大,甲基化的检出率也相对较低等缺陷。具有灵敏度高、最低检出限是1.5×102拷贝/ml,检测针对RASSF1A基因启动子区中第565号CpG位点,特异性强、获取容易、创伤性小,能够定量检测血浆DNA中RASSF1A基因甲基化。
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标签:化学分析
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